尿嘧啶-N-糖基化酶
产品编号:11780565103
品牌:罗氏/Roche
产品信息
产品描述 |
尿嘧啶-DNA 糖基化酶 (UNG) 具有较高的耐热性,是预防 PCR 残留污染的首选酶。
应用
使用不耐热的尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (UNG) 来防止 PCR 中 DNA 扩增产物的残留污染。 始终使用含有 PCR 混合物的 dUTP,以便通过 UNG 处理进行净化。 与来自大肠杆菌的 UNG 变体相比,这种热不稳定酶在常见 PCR 方案的初始热变性步骤中完全失活,并且形成的 PCR 产物不会被降解。
注意:对于高灵敏度实时 PCR,建议使用专门优化的 LightCycler® 尿嘧啶-DNA 糖基化酶。
产品特点:
尿嘧啶-DNA 糖基化酶水解 DNA 中的尿嘧啶-糖苷键,产生脱碱基位点,在该位点通过热、碱或核酸内切酶处理切割 DNA。 这种不耐热酶很容易因热变性而失活。
CAS 号:39369-21-7
特异性:水解单链和双链 DNA 中的尿嘧啶糖苷键; 对不含 dU 的天然 DNA 和 RNA 没有活性。
孵育:建议在 +15 至 +25°C 下孵育 10 分钟以处理 PCR 混合物; 在较高温度下,酶稳定性降低。
+40°C 时的半衰期:约 2 分钟
热灭活:+95°C 2 分钟足以灭活
最适pH值:8.3-8.9
抑制作用:活性不依赖于金属离子; EDTA 或其他螯合剂存在时无抑制作用。
属性:
外观: 透明、无色溶液
储存缓冲液:Tris/HCl,20 mmol/L; 氯化钾,100毫摩尔/升; DTT,1 毫摩尔/升; EDTA,0.1毫摩尔/升; 甘油,50%(v/v); Nonidet P40,0.5%(v/v); 吐温 20,0.5%(v/v); +4°C 时 pH 8.0
pH值:8.0±0.1
体积活度:≥1 U/μL
单位定义:1单位尿嘧啶-DNA糖基化酶,不耐热,定义为完全降解1μg纯化的单链尿嘧啶DNA(噬菌体M13,在大肠杆菌CJ236 dut-ung-中生长)所需的酶量 +37°C 60 分钟内。 作为比较,根据我们的单位定义,一个 Lindahl 单位相当于 520,000 个单位。 1 Lindahl 单位定义为在 +37°C 下 1 分钟内释放 1 mol 尿嘧啶所需的酶量。
非特异性核酸内切酶(MWM III DNA 和 M13mp9 ssDNA):+37°C 孵育 16 小时后,在高达 20 U 的溶液中无法检测到。
切口活性(pBR322 DNA):+37°C 下孵育 16 小时后,在 20 U 内无法检测到。
核糖核酸酶 (MS2 RNA):+37°C 孵育 4 小时后,在 10 U 内无法检测到。
功能测试、DNA 净化(在 PCR 检测中完全消除 10,000 份含尿嘧啶的模板 DNA):符合规范
动物源性添加剂:无
稳定性:在规格范围内 -15 至 -25°C 下可保存 18 个月。 |
背景
英文名称 |
Uracil-DNA Glycosylase,heatlab |
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