Tth DNA聚合酶
产品编号:11485954103
品牌:罗氏/Roche
产品信息
产品描述 |
Tth DNA 聚合酶是一种热稳定性 DNA 聚合酶,具有内在的逆转录酶活性,可将 RNA 进行 RT-PCR 扩增,长度至少为 1 kb。
直接从 RNA 扩增:基于Tth 聚合酶固有的逆转录酶活性,可一步直接从 RNA 中进行扩增。
提高 PCR 产量: 获得更多 PCR 产物,因为 Tth 聚合酶在长时间重复高温孵育过程中保持稳定。
增强扩增的特异性: 与其他逆转录酶相比,使用 Tth 聚合酶允许的更高退火温度,避免由于 RNA 二级结构而导致特异性损失。
应用
在 Mn2+ 离子存在下对真核基因组单拷贝基因进行一步 RT-PCR
对特定转录本或全转录本进行一步 RT-PCR
Mg2+ 离子存在下的 PCR
用修饰的核苷酸标记 PCR 产物
产品特点:
Tth 聚合酶是来自嗜热真细菌嗜热栖热菌物种的热稳定性酶的重组版本,在大肠杆菌中表达。
酶活性:高度持续进行的 5'-3' DNA 聚合酶; 无 3'-5' 核酸外切酶活性; 在锰离子存在的情况下,具有非常有效的逆转录酶 (RT) 活性; 无 RNase H 活性
最适 pH 值:约 9.0 (+25℃)
最适合伸长的温度:约+72℃
逆转录的最佳温度:大约 +60至+70℃
PCR 所需的二价离子:Mg2+
RT 活性和 RT-PCR 所需的二价离子:Mn2+
底物:加入dNTP、dUTP、dITP、各种标记或修饰的核苷酸(建议正常 dNTP 各 200 μmol/l,增加突变体浓度)
属性:
外观: 透明、无色溶液
储存缓冲液:Tris/HCl,10 mmol/l; 氯化钾,300 毫摩尔/升; EDTA,0.1 毫摩尔/升; DTT,1 毫摩尔/升; Triton X-100,0.1%(v/v); 甘油,50%(v/v); +25℃时 pH 值约为 7.5
酶活:≥5 kU/ml
单位定义:1个单位Tth DNA聚合酶定义为在标准测定条件下+75℃下30分钟内将10 nmol总脱氧核糖核苷三磷酸掺入酸可沉淀DNA的酶量。
非特异性核酸内切酶 (λDNA):在 +37℃下孵育16小时后,在高达 20 U 的溶液中无法检测到。
切口活性(pBR322 DNA):+37℃下孵育 16 小时后,在 20 U 内无法检测到。
核糖核酸酶 (MS2 RNA):+37℃孵育 4 小时后,在 20 U 内无法检测到。
PCR 功能测试(10 ng 人类基因组 DNA、1.1 kb 胶原片段):符合规格
RT-PCR 功能测试(10 ng 人肝 RNA,630 bp MCAD 片段):符合规格
动物源性添加剂:无
稳定性:在规格范围内 -15 至 -25℃下可保存 18 个月。 |
背景
英文名称 |
Tth DNA Polymerase, HB8 |
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